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現(xiàn)如今,隨著科技的發(fā)展,細(xì)胞保存這一領(lǐng)域取得了進(jìn)步,諸多生物材料的低溫保存,例如血細(xì)胞、干細(xì)胞、精子、卵細(xì)胞、胚胎、角膜、皮膚、胰島等,隨著低溫保存技術(shù)的發(fā)展得以實(shí)現(xiàn)。在這其中,海藻糖作為低溫保存常用的非滲透性保護(hù)劑,實(shí)力不容小覷。
低溫保存技術(shù)的進(jìn)步,給細(xì)胞保存帶來了哪些實(shí)際意義?
血細(xì)胞的長期保存解決了臨床上血液供需不平衡的問題;干細(xì)胞的保存在**再生障礙性貧血、白血病中能減少抗宿主病的發(fā)生率;生殖細(xì)胞的保存對(duì)再生醫(yī)學(xué)和輔助生殖影響深遠(yuǎn)。
海藻糖的作用原理是什么?
海藻糖作為低溫保存常用的非滲透性保護(hù)劑,這類保護(hù)劑分子不能進(jìn)入細(xì)胞,但可以提高胞外溶液的溶質(zhì)濃度,不僅能在細(xì)胞外形成高滲,減少胞內(nèi)冰的形成,還具有較高的玻璃化溫度,易形成玻璃態(tài),一方面避免了低溫對(duì)細(xì)胞膜蛋白質(zhì)和脂質(zhì)的損傷,另一方面將細(xì)胞膜的蛋白質(zhì)分子支撐包裹起來,使之不易變形,**細(xì)胞膜融合,降低細(xì)胞膜的通透性。
目前研究中,應(yīng)用含不同濃度海藻糖的保護(hù)液,對(duì)低溫保存肝*細(xì)胞[1]、犬氣管困、卵巢*細(xì)胞和宮頸*細(xì)胞及小鼠受精卵,均取得了良好的保存效果。胎牛血清( FBS)也有助于細(xì)胞的冷凍保存,且在腸道**組織原代細(xì)胞、牛成纖維細(xì)胞等低溫保存中效果****。
Zheng等用麥管和石英毛細(xì)管作為冷凍載體,使用兩種滲透性保護(hù)劑EG和DMSO(體積分?jǐn)?shù)為8%、15%)及一種非滲透性保護(hù)劑海藻糖(0.5 M)玻璃化保存了人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞( HUVECs)。結(jié)果表明,用1.4 M EG加1.1 M DMSO,并用石英毛細(xì)管玻璃化可以得到90%的存活率[2]。
血小板在保存過程中結(jié)構(gòu)和功能會(huì)隨著時(shí)間延長而發(fā)生變化,這些改變統(tǒng)稱為儲(chǔ)存損傷(platelet storage lesion , PSL)。常規(guī)的血小板保存條件為22 ℃振蕩保存5d。為了減少血小板的儲(chǔ)存損傷,人們嘗試采用低溫保存方法,低溫保存雖可以延長血小板保存時(shí)限,但低溫易致血小板發(fā)生活化,使其在輸注到受者體內(nèi)后失效并很快被**。研究表明,加入海藻糖能**血小板儲(chǔ)存過程中的損傷及減少凋亡的發(fā)生[3-4]。
參考文獻(xiàn)
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3 Wang X,F(xiàn)an Y,Shi R,et al. Quality assessment of platelets stored in a modified platelet additive solution with trehalose at low temperature(10℃)and in vivo effects on rabbit model of thrombocytopenia [J].Platelets,2015,26(1): 72一79.DOI: 10. 3109 /09537104. 2013.872772
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